猪痘流行与防控研究进展

肉类食品网 http://www.meat360.cn 2023/5/28 7:41:27 关注：465 评论： 我要投稿

  猪痘流行与防控研究进展
  郑红飞 1，2，尚佑军 1 *
  （1.中国农业科学院兰州兽医研究所，甘肃?兰州?730046；2.甘肃省动物疫病预防控制中心，甘肃 兰州 730046）

  猪痘（Swine pox，SWP）又称为猪天花，是一种猪的病毒性传染病，其可以由猪痘病毒（Swine pox virus，SWPV）或痘苗病毒（Vaccinia virus，VACV）感染引起。自19世纪40年代，在欧洲第一次被发现并报道后，相继在北美、南美和亚洲等地区也出现相同病例，并在非洲和澳大利亚的许多地区流行。现在该病在世界范围内均有分布。虽然该病在生产实际中对养猪业发展带来的损失与非洲猪瘟、高致病性猪蓝耳病或伪狂犬病等相比相对较轻，但是发病后的继发感染等问题会造成患病猪生产性能降低，抵抗力下降等影响。近年来，该病逐渐受到更多养殖者的重视。
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  流行特点
  1.1 具有较高的宿主特异性和组织嗜性
  SWPV只可引起家猪和野猪发病，其中哺乳仔猪和育肥猪较为易感，尤其是三月龄以内的仔猪感染后，会表现出明显的临床症状，死亡率较低，并且终身免疫，成年猪具有一定的抵抗力，以隐性带毒为主发病猪临床上以皮肤和黏膜出现特异性痘疹等病变为特征，通常表现为全身弥漫性痘疹，尤其集中在腹部、腿部内表面、耳廓和面部等部位，病变部位一般会经历斑疹、丘疹、水疱到脓疱或结痂的过程。Kaiser FK等通过qPCR方法，对先天性感染仔猪不同器官中SWPV的组织嗜性进行研究发现，皮肤、脐带和舌头等组织的Ct值最低，肺和肠的Ct值较高，这与猪痘表现出临床病变的部位一致。Datt NS等用SWPV诱导感染其他物种（如：小鼠、兔子、绵羊等）或非猪源性细胞不会出现特征性皮肤损伤或细胞病变，但在部分非猪源性细胞内可以存活。
  1.2 传播途径多样
  SWPV的传播通常与养殖环境和卫生条件有关，环境卫生条件越差，病原越容易被贮藏和传播。除了感染猪只与易感动物直接接触感染外，猪虱和蚊蝇等媒介昆虫在SWPV的传播过程中也扮演着重要角色。有创伤的易感猪只，在被病原污染的环境中感染本病的风险较高。此外，Borst等研究表明，SWPV 在自然感染的病猪中存在垂直传播的可能性。
  1.3 对环境抵抗力较强
  猪痘四季均可发生，尤其在春秋季节交替时发病率有所上升。SWPV通常在发病猪和潜伏期感染猪皮肤痘疹的渗出液、脓疱和痂皮中含量较高。自然生产环境下，随着痘痂脱落或病猪蹭痒等因素，SWPV会污染周围环境，并且长期存在。根据有关研究报道，SWPV在温热、干燥和寒冷环境都表现出较好的适应性和稳定性，能够存活几周到几个月不等，但是对高温、紫外线、酸性或碱性溶液和酒精等消毒液的耐受力较差，通常在数分钟内即可灭活。
  1.4 分布范围广
  自1842年猪痘在欧洲被Spinola等首次报道以来，非洲、澳大利亚、北美洲、南美洲、大洋洲、亚洲等世界多地均陆续报道发生猪痘疫情，现已广泛分布于世界各地，甚至在部分国家和地区出现了爆发和流行。我国也有猪痘的相关报道，1998年韦天超报道广西玉林市一猪场断奶仔猪发生猪痘，2001年蒲勇军等报道山东烟台发生区域内首例猪痘，2008年范永青等报道黑龙江海林市2001～2007年猪痘发病率超过50%，2012年邓舜州等人从江西部分猪场母猪皮肤痘斑中分离出猪痘病毒，2020年丁军营等人报道河南驻马店一猪场发生猪痘继发支原体肺炎的情况。此外，国内其它地区也时有报道。
  1.5 毒株变异性低
  世界不同地区报告的SWPV在其核苷酸水平和氨基酸水平方面具有高度相似性。Mech P等对从印度阿萨姆邦猪群中分离出3个SWPV分离株（SWPV01KA_Assam、SWPV02KM_Assam和SWPV 03LKM_Assam 3）进行序列比对分析，发现序列之间相似性可达到97%～100%，并且与之前报道的来自印度 (AVA121) 和从北美家猪SWPV / USA / 2002，GenBank登录号：NC_003389）、德国家猪（SWPV/domestic/GER/2019，GenBank登录号：MZ773481）和野猪（SWPV/wildboar/GER/2019，GenBank登录号：MZ773480）体内分离出的SWPV分离株核苷酸序列和氨基酸序列同源性极高，可达到99%～100%。邓舜洲等对从我国江西地区分离出的SWPV毒株与参考毒株（AF10153.1）相比较，发现各阳性样本之间核苷酸同源性（97.7%～100%）和推导的氨基酸同源性（98.2%～100%）很高，与参考毒株相比，核苷酸同源性为96.3%～98.4%，推导的氨基酸同源性为87.5%～88.5%。说明SWPV具有高度的保守性，不易发生变异。
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  诊断
  2.1 临床诊断
  SWPV在临床上主要引起易感猪皮肤、黏膜等部位发生痘疹，也有报道SWPV会造成怀孕母猪流产、产死胎或垂直传播给新生仔猪发病。De Boer GF等研究发现，SWPV感染猪只会出现丘疹期、脓疱期和水泡期，无明显的脓疱期，VACV感染猪只有明显的脓疱期，并且VACV结痂时间比SWPV结痂时间短。临床上猪痘、猪圆环病毒病、疥螨、猪水疱病和口蹄疫等疫病症状相似，都会出现体温升高，精神沉郁，腹部、腿内侧、乳房和鼻盘等被毛较少的皮肤出现红色痘疹，随后痘疹突出体表，逐渐发展为水泡、脓疱，最后结为深棕色痂块等，而其它种类疫病很少表现此类症状，这为猪痘临床鉴别诊断提供了范围和方向。此外，虽然该病最初表现出临床症状是在保育舍，但病猪大多是在转群至育肥舍后表现出明显临床症状。
  2.2 病毒分离培养
  在培养细胞中分离病毒被认为是检测痘病毒的“金标准”。1960年Kaszal等第一次从猪的原代PK-15细胞中成功分离出SWPV，并传代培养。Mech P等用从印度阿萨姆邦地区自然感染SWPV的病猪痘痂样品中回收的病毒感染PK-15细胞，经过3代盲传均未观察到细胞病变，从第4代开始观察到病毒诱导的细胞发生病变，并在接种后第4天到第6天，细胞病变达到80%。根据Bárcena等报道，表达β-半乳糖苷酶的重组SWPV不但能在PK-15和ESK-4猪源细胞系中感染增殖，也能在CV-1、BHK-21和Hela等非猪源细胞系中高水平感染和复制，并可以连续传代。研究结果表明，PK-15 细胞系可能是目前分离SWPV最为理想的选择。Massung等发现，用SWPV和VACV分别感染细胞后，前者一般在接毒24 h就会出现细胞病变，而后者一般在接毒4 d后才能观察到不明显的细胞病变。Winslow BJ等研究指出，SWPV不能在非猪源细胞中增殖，也不能在鸡胚中传代，但在人、猴子、仓鼠等哺乳动物细胞内可以存活，并可以作为外源蛋白表达的载体，但VACV既可以在猪源和非猪源细胞中增殖，还可以在鸡胚尿囊膜上增殖，并形成坏死痘痂。这为SWPV和VACV鉴别区分提供了依据。
  2.3 光镜和电镜观察
  J.S.Teppema等对人工感染SWPV病猪的皮肤组织进行光镜和电镜研究。通过光镜发现，病变表皮细胞核肿胀含有空泡，细胞质变亮并存在不同类型的嗜酸性包涵体。通过电镜发现，SWPV感染的细胞发生病变，线粒体肿胀成空泡状，含有大量未成熟和成熟的病毒颗粒，成熟病毒颗粒大小在350×175 nm（哑铃形）到350×250 nm（砖形）不等。病毒颗粒的发现，对诊断该病有实质性意义。
  2.4 分子生物学检测
  与传统的实验室检测方法相比，基于分子生物学的疫病诊断具有更加快速、准确和灵敏等优点，目前也已被确认为许多病毒性疾病的最佳诊断方法。De Boer GF等通过对恢复期猪感染以及使用琼脂凝胶扩散沉淀和免疫电泳等检测方法，将SWPV和VACV进行区分。印度和巴西用常规PCR检测方法诊断猪痘，很大程度上提高了对猪痘的诊断水平。2019年Souza FA等报道了一种可以快速检测和量化SWPV的实时定量PCR （qPCR）方法，该方法在临床诊断测试中具有很高的敏感性和可重复性，使SWPV诊断更加准确、高效。
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  防控
  3.1 加强饲养管理
  切断病原传播途径至关重要。基于SWPV在寒冷、温热环境中均能长时间存活，且主要由猪虱、蚊蝇等媒介昆虫传播的特点。做好猪舍环境卫生清洁工作，定期驱虫消毒，灭蚊灭蝇，降低环境中病原微生物含量，防止发生继发性疾病。
  增强猪群抵抗力是防控猪痘发生的有效措施。仔猪断奶至三月龄期间，体内母源抗体水平急剧下降，而自身免疫系统尚未完全建立，在此空窗期，仔猪抵抗外界疫病的能力有限，感染疫病风险较高。可通过优化饲料配比，抗寒保暖，加强运动，降低应激等方式提高猪群抗病能力。同时，对发病猪及时进行隔离，采取积极治疗措施。
  3.2 药物防治
  由于猪痘在日常生产实际中对养殖业造成的影响相对较小。截止目前，尚未研制出专属猪的痘病疫苗，但郑金生等人在临床上用山羊痘活疫苗3头份，配合聚肌胞2 mL，黄芪多糖10 mL每天每头肌注一次治疗猪痘，取得了可观成效。对于由猪痘痘疹破溃继发的细菌感染，可用生理盐水或1%高锰酸钾溶液冲洗疮口，涂抹甲紫或3%碘酊溶液，或注射抗生素治疗。同时，定期使用有机磷酸酯类或大环内酯类驱虫药，对易感猪体表和体内寄生虫进行杀灭，可有效降低媒介昆虫传播疫病风险。
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  结语
  SWPV和其它痘病毒引起动物发病的症状、过程、预后等方面有相似之处。由于猪虱等媒介昆虫是传播SWPV的主要机械载体，故猪痘常发于容易滋生蚊虫，环境卫生差的猪舍，病变通常发生在易感猪腹股沟、腿内侧、腹部等皮肤角质化程度较低和猪虱较易寄生的区域。SWPV能在环境和猪虱中长时间存活并保持传染性，发病猪场如果不能及时彻底做好猪舍清洁消毒和驱虫灭蚊等工作，可造成仔猪连续发病，并形成区域性流行。成年猪可能是由于其免疫系统已经发育完善，对SWPV和继发细菌本身具备一定抵抗力，故感染后表现较为温和，这是猪痘经常被饲养者忽视的重要原因，也为家猪群中SWPV的实际流行情况调查带来了困难。
  De Boer GF等研究指出，猪痘康复猪对SWPV有终身免疫力，但对VACV无免疫力，同样VACV感染康复猪仍然可以感染SWPV。说明SWPV和VACV在血清学上没有交叉保护性，新生仔猪可以从康复母猪体内获得母源抗体，有效预防SWPV侵害。此外，猪痘病毒疫苗研制方面目前仍为空白，尚无成熟专用的疫苗可用，生产实际中，一般都是按照抗病毒，防止继发感染和提高机体抵抗力的原则来治疗。虽然治疗效果良好，但研发猪痘专用疫苗应该是下一步猪痘防控的重点工作之一。与此同时，由于猪痘与圆环病毒2型引起的皮炎肾病综合征、猪水泡病、疥螨、口蹄疫等病在临床上症状有相似之处，临床诊断时易混淆，提升对以上几种疫病的鉴别诊断能力也是今后猪痘防控努力的方向。